主题:【原创】这是真的吗?Maxipreps concentration=4163.1ng/ul?! -- 大鹏翔宇
今天犯小人,最近又太累了,就先不填坑了,大鹏还要在地幔里呆上一段时间。
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现在向河里生物专业的大牛们请教个问题,大家知道俺是个实验室里的新丁,现在正在练习实验技术。
导师给了两个质粒(plasmid),一个叫phRL SV40 DELTA 197,一个叫phRL TK DELTA 238。都是溶在Whatman 3MM paper上(跟咱河里三好MM没关系啊)送来的。我把它们用buffer溶了,transform进E.coli JM109然后inoculate进5ml LB media,做Minipreps提纯质粒以后,做double digest再跑Agarose Electrophoresis检查正常。
上个星期我花了三天用Minipreps提纯的质粒做了个Maxipreps,用的是Promega的Wizard Maxipreps Kit。做好后今天用Nanodrop Spectrophotometer测了浓度。
这是检测结果:
phRL TK DELTA 238
这个还算正常,
phRL SV40 DELTA 197
这个浓度让试验室里所有师兄师姐大眼瞪小眼,“This is increditable!”“Unbelievable!”
大鹏有点摸不着头脑了,不是吧?哪里做错了?
印度师姐索尼说了(没错,她就叫Sony):“Usually it is between 2000 and 3000,sometimes gets higher than 3000,but 4163.1,that is too high!”
啊?太高了?会不会有啥问题?
东北师兄过来说:“兄弟啊,要不咱跑个胶看看?”
跑就跑!
胶体电泳结果:
1为DNA 1kb ladder
2-4为phRL SV40 DELTA 197,依次为10×,20×,100×倍稀释的质粒
5-7为phRL TK DELTA 238,依次为10×,20×,100×倍稀释的质粒
根据条带的亮度看来的确是非常浓的质粒溶液,不过Promega给出的Maxipreps浓度也就是2000-3500ng/ul,这个是不是太高了点?
期待高人的解答。
另外,可否请教一下那些专业名词的中文说法,大鹏的专业是用英语学的,爸妈问三年都学了些啥,张了半天嘴愣是说不出来,都是英语啊,真惭愧!
在此一词一花悬赏征名!
另:最近lab要搬家,等腾出时间来要在科技版写写lab里的人和事,暂定题目:
“萨达姆哪里拱”---一个中国学生眼中的英国生物实验室
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🙂【原创】这是真的吗?Maxipreps concentration=4163.1ng/ul?!
😄应该没问题。 1 嘎嘎 字334 2006-10-06 12:59:29
😄嘎嘎兄好久不见了,真想你啊 大鹏翔宇 字145 2006-10-06 16:55:53
🙂酶切的结果出来了 1 大鹏翔宇 字477 2006-07-13 18:31:11
🙂Small questions/suggestions 1 老虎尾巴 字1372 2006-07-17 18:14:52
😄谢谢指教,有几点解释和疑问 大鹏翔宇 字462 2006-07-17 22:54:40
🤔More question 1 老虎尾巴 字618 2006-07-18 08:38:55
😥我是要用来做transfection的 大鹏翔宇 字260 2006-07-18 08:48:39