五千年(敝帚自珍)

主题:茗谈185-五常互保(1) -- 本嘉明

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家园 仅就我懂的说一点儿

文中所述的石秀丽文章与1988年猪流感血清学检测的差异的原因是:

金笔或者是个外行,或者是坏,有意误导大家

猪流感的文章测的是抗血清凝血抑制滴度,而石的文章做的是酶联免疫吸附试验(ELISA)。

先看猪流感的文章。我找到了引用图的原出处 JAMA. 1991 Jan 23-30;265(4):478-81.

Swine influenza virus infections. Transmission from ill pigs to humans at a Wisconsin agricultural fair and subsequent probable person-to-person transmission.

文中用于测试的叫做流感病毒凝血抑制测试 (Influenza hemagglutination inhibition assay),由流感病毒凝血测试发展而来。简单的原理是,流感病毒表面的血凝素蛋白(hemagglutinin, HA)能够造成血细胞凝集,因此通过对同样数量的血细胞加入一系列稀释浓度的流感病毒,,就会出现在某一个稀释浓度开始出现凝血反应,这个稀释浓度就被称为滴度(titer)。

进一步地,我们知道受感染个体血液中可以产生抗体,中和病毒而降低病毒产生的凝血效应。所以当我们想测试血清中抗体的水平时,会准备一个固定数量的血细胞和病毒,然后把含抗体的血清进行梯度稀释,加入到每一个病毒+血细胞的混合物中,就会在某个抗血清浓度开始抑制凝血反应的发生,这个浓度被称为凝血抑制滴度(hemagglutination inhibition titer, HI titer),即图表中所示的实验结果。

在实际测试操作中,稀释都是按照整数倍梯度进行的,比如10,20,40,80等等。因此所有滴度的结果都会是整数,而且是一组比较整齐的整数。

而在石文章中做的酶联免疫吸附试验(ELISA),具体操作中有变化,基本原理都是看有多少抗体与病毒结合,结合的越高,信号越强。这个信号是仪器读出来的具体数值,有整有零,在分布上不会整齐。酶联免疫是一种半定量方法,其读数值受抗体亲和力的影响,只在一定范围内呈线性相关。而且由于读取的是光吸收值(OD),比尔-朗伯定律(Beer–Lambert law)一般在0.1-1.0之间的线性度较好。对于一个均匀分布的样品,低OD值的数据点会更密集。

简单说,这两个图不是一种测试,不是一类样品,没有任何的可比性。不知道金笔为什么要这么比,以及拿一个如此古早的图(91年的文章)来比。

关于划定阴性结果区间的问题

石的文章中明确说了如何划定负结果区间,即240个武汉样品的平均值加三个标准差,这是统计中常用的方法。

We used the mean OD value of the 240 samples plus three standard deviations to set the cutoff value at 0.41.

猪流感的文章中也是人为划定的,试验方法中明确说将HI滴度高于20的作为阳性结果(A reciprocal SIV HI titer of 20 or greater was considered positive),且没有注明具体原因。因为这种划定和具体实验操作相关,每个实验室的选取都可能存在差异。应当说,猪流感文章的标准划得更人为一些。

通宝推:吴用,桥上,审度,青颍路,
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