主题：【原创】从台湾诈保案聊起——DNA鉴定的前世今生 -- 游识猷
家园 明白了点DNA变条码的过程 家园 弱弱的提个小白建议 干脆别讲技术了，那样被挑错的几率太大，改讲DNA鉴定的故事得了... ...(技术名词咱看不懂，但是故事我喜欢
）家园 谢谢建议 故事会讲的，技术也要继续讲（嗯，有困难要上，没有困难制造困难也要上），感谢挑错的回帖，没有他们挑错，我怎么知道自己的错误呢。^^
家园 溴化乙锭 是在跑胶前就已经插入到DNA 片段了吧？ 而不是像溴酚蓝染蛋白那样“染色”， 还有，果冻真的用琼脂做的，琼脂糖。。。。呃，就不知道了
加油加油哦
- 复 溴化乙锭
家园 有没有学食品的能告诉我，琼脂里面是含有琼脂糖么？ 头晕，换另一个话题吧。
现在的通行做法是把溴化乙锭放在胶里，这样DNA一边跑，EtBr就一边插进去。但早先的做法是把EtBr加在溶液里，然后给gel“染色”——这是我硕士班的老板说的，希望我没记错。= =
家园 两种做法都可以，看各人喜好和具体实验要求 EtBr加在胶里或者事后染色，除了方便的考虑，选择这两种方法，还要考虑这个问题：EtBr带正电，DNA的移动速率会受插入量的影响，EtBr插得越多DNA跑得越慢。这对某些用途来说不是很理想。
此外因为EtBr带正电，它的前界面会相对DNA做相向运动（在1％琼脂糖里的移动速率大概相当于几百bp的DNA片断），所以还没等DNA跑到头，小一些的DNA片段就已经跑出EtBr的前界面了，在低EtBr浓度的氛围里，DNA里插的EtBr会慢慢掉下来，荧光检测信号就低了。这对检测DNA的灵敏度和定量影响比较大。
所以把EtBr放在胶里，并不是很理想的做法。但是这样做比较方便，所以很流行。
事后放在EtBr里泡，从定量和测分子量的角度看，是最理想的。缺点是EtBr是在液体里，而且相对浓度要高一些，污染的可能性要大一些。此外多花5分钟泡胶也有点麻烦。一般情况下没必要给自己找这些麻烦。
另外，琼脂糖是琼脂除去了[带硫酸基团成分(这个词组比较长)]——琼脂胶的产物，它是不带电荷的，所以用来搞电泳很合适，不过要比琼脂贵许多（纯度比较高的就更加贵）。琼脂在中性pH附近带负电荷，而在带电基质里的电泳不很理想，受电渗的干扰比较大，因此琼脂做电泳基质是不很理想的。假如要跑带正电的东西还得考虑电荷相互作用的问题。
琼脂是直接从海藻里提取的，用在食品工业上的纯度也不算很高，所以很便宜，可以按公斤加。
本帖一共被 1 帖 引用 (帖内工具实现)家园 跑EB胶现在一般不作精确定量用吧 通常是看条带位置，判断DNA片段大小。
至于EB胶的DNA定量推算，一般就是估算个量级。然后再用Nanodrop、分光光度计之类的精确定量。
家园 是我记混了 嘻嘻嘻，不好意思，不好意思
家园 白璧微瑕 琼脂是agar，琼脂糖是agrose，不一样的
图里的胶片不是溴化乙锭染的吧？应该是放射自显影的片子吧？
家园 建议后续直接回在主贴下面 西西河的习惯，看起来方便一些。
挖坑容易填坑难呀。
