主题：【原创】从台湾诈保案聊起——DNA鉴定的前世今生 -- 游识猷
家园 花，有游mm捧场！
家园 别喝水了，赶快填坑吧 家园 DNA鉴定发展简史（一） 要说DNA鉴定，咱就得先从DNA这个分子本身说起。
1952年时，科学界就基本确定了人的遗传物质是DNA。进一步研究也表明，除了同卵双胞胎，每个人的DNA都各不相同。但DNA第一次真正被用在刑事鉴定上，则是1986年的事情。
要比对DNA，一般最直觉的想法就是对DNA测序。众所周知，DNA分子是由ATCG四种碱基组成。如果把碱基比成字，那么一个人的整套DNA就像一本由这些字组成的天书。而这本天书里究竟有几个字呢？足足三十亿！所以假如想用DNA测序的方法来比对DNA的话，就像为了比对两本书是不是同一本，结果要要一字字把这书里的三十亿个字读完——费事、费时、费钱。再者，测序对DNA的纯度、数量也要求很高，一般司法鉴定中，不能也不会用这种方法来比对DNA。
外链图片需谨慎，可能会被源头改英国莱斯特大学的遗传学家Alec Jeffreys就是DNA鉴定的开山祖师，他首次通过DNA的限制性片段长度多态性（Restriction Fragment Length Polymorphism）来比对不同人的DNA。
如果你觉得“DNA的限制性片段长度多态性”太过不知所云的话，那么这项技术还有个更通俗易懂的名字——DNA指纹技术。
外链图片需谨慎，可能会被源头改这就是Alec Jeffreys，他手上举着的那张底片，就是所谓的DNA指纹。
DNA的限制性片段长度多态性里的“限制性”三字来源于这个技术里所用的限制性内切酶。那是一大类在细菌里发现的蛋白质，它们能特异性地辨认出DNA的某些4-8个碱基长的特殊序列，然后把那个序列切开。比如限制性酶中的特别常用的一个EcoRI，就是在大肠杆菌中发现的 ，它专认GAATTC这个序列。其他的限制性内切酶，辨认的序列又各有不同。
外链图片需谨慎，可能会被源头改DNA分子的形状就像一条长长的飘带，当将限制性内切酶和DNA加在一起时，那酶就顺着这条飘带一路认，认出它所特异对应的序列后，就在那儿，像把剪刀一样“咔嚓”把DNA一切。一条连续的DNA就这么被限制性内切酶咔嚓咔嚓地切成了数段。
外链图片需谨慎，可能会被源头改每个人的DNA被限制性内切酶切后，形成的片段数量不同、大小各异，这就是所谓的“DNA的限制性片段长度多态性”，也是第一代DNA鉴定的原理。
一个人的DNA被酶切后出来的片段们固然是各不相同，可怎么比对呢？
这就得介绍DNA片段们的赛跑场——琼脂糖凝胶。
【被催出来的下文…… 此坑依然很大…… = = 】
通宝推：小丘,龙驹坝,
本帖一共被 1 帖 引用 (帖内工具实现)家园 只记得DNA是在细胞核里的 您说的内切酶能进入细胞核；还是剪切之前，细胞核已经被打开？
家园 多谢提醒，剪切前得先把细胞核打开 DNA提取出来。
非常谢谢您提醒我的疏忽之处。
家园 看到DNA的纯度，想到了考古中的DNA鉴定 纯度是个大问题啊，弄不好就到别人家去了，呵呵。
考古老芒正在申请验证，请有投票权的老河友们看着合适就支持一票，老芒在此先谢过啦。
家园 进坑送花。。。呵呵 鲜花已经成功送出，可通过工具取消
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家园 所谓DNA测序比对不是全基因组序列比对 而是对一些STS之类的多态性标签序列进行测序后多重比对
测序对DNA的纯度要求当然很高，至于数量，由于测序实验中包括两轮PCR扩增，其用量其实并不多嘛。
家园 谢谢，STS是现在的做法 我还没讲到那个呢…… 大坑才开挖，请大家保持耐心…… orz
另外，数量的多少是相对的，咱们做实验的时候那当然要多少有多少，但作为罪案证据的DNA，考虑到降解啊污染啊，有的时候确实是少到无法测序的。
家园 好文章，跳个小刺 RFLP是DNA指纹技术的一种，SSR, RAPD,也都是DNAfingerprint
家园 DNA鉴定发展简史（二） 
外链图片需谨慎，可能会被源头改说琼脂糖可能大多数人不知道，不过等它变成一种叫果冻的玩意儿，那认识的人就多了。
酶切后的DNA片段们被加进琼脂糖做成的胶里，然后在电场的作用下，在胶里慢慢地向正极方向移动。长点的DNA片段质量大，吭哧吭哧地跑得就慢点儿。 短点的DNA片段质量小，呼嗨呼嗨地跑得就快点儿。起跑点虽然相同，但跑上一阵子之后，它们之间的距离就拉开了。
最后，我们用溴化乙锭给已经拉开距离的DNA片段们染色，溴化乙锭能在紫外光下发出肉眼可见的橙色光，把这片含有发光的DNA片段的琼脂糖胶拍下来以后，就成了一张张DNA指纹图了。
外链图片需谨慎，可能会被源头改这样子，我们在比对DNA的时候，就不再是一字一字地去读那三十亿字的天书，而是好似把天书以一种特定的编译方式，转换成了对应的一套条形码，之后，我们所需做的，只是比对条形码的形状即可。
Alec Jeffreys发展出这套技术是在1984年，两年后，英国警方就来敲他的门了。当然不是来逮他，警方是来找他帮忙的。
1983年11月，在英国的Narborough这个地方，一个叫Lynda Mann的15岁花季少女被残忍地强暴后杀害了。狡猾的凶手留下的线索非常少，警方最后只能确定罪犯是一个A型血的男性。这个案子一直悬而未决。
1986年7月，又一名15岁的少女Dawn Ashworth遭到了同样的噩运。这个案子里，罪犯的行为模式与犯罪手法，在在与1983年的案子高度吻合，并且非常重要的一点是，这个罪犯也是A型血！
外链图片需谨慎，可能会被源头改右边是Lynda，左边是Dawn，两朵早早凋谢的小花。
警方把怀疑的目光投向了当地的一个17岁少年，Richard Buckland。
【第二把土，我很努力填坑了…………】
通宝推：otto,大地窝铺,
本帖一共被 1 帖 引用 (帖内工具实现)家园 外行提个问题。。。 外行提个问题。。。
DNA的碱基对应该是纳米尺度的东西，片段应该也很小啊，荧光怎么能看见放大成那么大的胶片啊。。
还有一个没看懂的是，dna被切成片后，在琼脂里跑一遍，形成前前后后的队列后~怎么比呢？
比如A样品里DNA链分成6段，B样品分成7段，怎么比呢？会不会B多出的那一段是因为B样品两条DNA链分出的。。A样里的6段式一条DNA分的。。
我基本是生物盲。。就高中生物知识。。。不知道我的疑问表达清楚没有。。。多担待。。
家园 试着简单答一下 DNA的碱基对应该是纳米尺度的东西，片段应该也很小啊，荧光怎么能看见放大成那么大的胶片啊。。DNA的单个碱基确实很小，但是人的一个细胞里的46条染色体，就包含30亿个碱基。
而且这里的样品是从一大堆细胞里提取出来的。
所以这里讨论的每一个条带，是由数以万计的“DNA片段”组成。而每个DNA片段，都包含有数以万计的碱基——这样分子量就不会太小了。
比如A样品里DNA链分成6段，B样品分成7段，怎么比呢？会不会B多出的那一段是因为B样品两条DNA链分出的。。A样里的6段式一条DNA分的。。不会的，AB样品都会是双链。DNA的两条链间是有分子引力存在的，内切酶只能咔嚓地把它拦腰截断，要让两条链分开，还需要另外施加外力。
谢谢你的提问，不知道我讲清了没。